Сектор здравоохранения Определение характеристик линии клеток
Специалисты компании SGS используют целый ряд методик на основе нуклеиновых кислот и белков для определения подлинности линий клеток и оценки структуры экспрессионной конструкции.
Поручив нам определение характеристик линии клеток, вы воспользуетесь нашим высококачественным оборудованием и опытом наших специалистов для обеспечения безопасности вашей биофармацевтической продукции.
Согласно положениям руководства ICH Q5B, для использования тех или иных линий клеток в производстве препаратов рекомбинантных белков необходимо определить характеристики экспрессионной конструкции и готового очищенного белка, чтобы обеспечить получение стабильной продукции на основе рекомбинантной ДНК. В ходе анализа должно быть установлено, что в клетку-хозяина вводится правильная кодирующая последовательность, которая сохраняется при выращивании до окончания производства.
Методы определения характеристик линии клеток:
- анализ копийности генов и плазмид;
- проточный цитометрический анализ (FACS Canto II);
- определение антигенов гистосовместимости;
- блоттинг по Саузерну;
- ДНК-генотипирование;
- секвенирование ДНК (в сотрудничестве с компанией «DNA Vision»);
определение биологической безопасности;
- анализ на занесенные вирусы (ICH Q5A);
- определение отдельных вирусов и бактерий методом количественной ПЦР;
- титрование вируса по бляшкообразованию;
- реакции гемагглютинации и гемадсорбции;
- определение микоплазм в соответствии с Евр. Ф. 2.6.7 и руководством FDA;
- метод культуры клеток;
- метод индикаторных клеток;
- метод ПЦР;
- испытание на стерильность;
- прямая инокуляция;
- метод фильтрации.
- Альтернативные аттестованные методы: BactT/Alert 3D (результаты испытания на стерильность получают в течение 72 часов);
- анализ на бактериальные эндотоксины;
- определение остатков клетки-хозяина:
- остатков характерной ДНК и РНК;
- остатков ДНК, специфичной для клетки-хозяина;
- анализ белков клетки-хозяина.
Свяжитесь с SGS прямо сейчас, чтобы узнать, как мы можем помочь вам в определении характеристик линии клеток.